实验目的：小鼠结扎技术和超数排卵(超排)与取卵是转基因技术涉及的关键步骤之一，雄性小鼠结扎后与雌性小鼠交配可以获得假孕雌性母鼠。

实验动物：雄性小鼠：6～8周龄，15～20g，2～5只。雌性小鼠：4～6周龄，15～20g，2～5只。

实验材料：

1、器械：眼科剪、眼科镊、剪毛剪、手术刀、消毒手术巾一块，消毒棉球若干，0号缝线一卷，蜡板两块。

2、试剂：1%戊巴比妥钠，75%酒精、碘酒、新洁尔灭消毒液。

实验内容：

(一)不育雄性公鼠:结扎公鼠与母鼠交配以后产生假孕母鼠。受结扎的公鼠需8周龄以上，对种系无特殊要求。

腹腔注射1%戊巴比妥钠0.2～0.25ml，5min后，小白鼠处于完全麻醉状态，打开腹腔约1cm的开口，从阴囊把精巢和输精管压出外边，在输精管上相隔5mm左右间隔的两处结扎好，并把中间剪断，对另一侧输精管进行同样的手术，手术结束后，按常规缝合伤口。

(二) 超数排卵(超排)与取卵

1、超数排卵：在雌性动物发情周期的某一阶段,用促性腺激素促使卵巢里大量卵泡成熟并排出，称超数排卵。影响母鼠超排因素有母鼠的性成熟程度、营养、体重及母鼠种系。超排的最佳时间随种系不同而异,一般在3～5周，超过6周超排卵数明显减少。

取4～6周龄的母鼠作超排卵供体，腹腔注射孕马血清(PMS) 和人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导母鼠排卵。PMS模拟卵泡刺激素(FSH)作用，hCG模拟黄体生成素(LH)的作用。二者注射时间间隔为42～48h，排卵发生在注射hCG后10～13h,注射剂量为每鼠5～10u。为了实验方便，常在下午注射PMS，隔日同一时间注射hCG，注射hCG 后每只母鼠置于一个单独饲养的正常公鼠笼内，次日晨检查阴道栓。

2、取卵：用颈椎脱臼法处死有阴道栓的雌鼠，把完整的输卵管带一小段子宫剪下,置于PBS平衡盐溶液中，在解剖镜下找出输卵管伞部，用带4号针头的注射器将受精卵冲出，立即将卵子换至新鲜培养液内洗涤3～4次即可用于显微注射。