1、了解皮肤移植实验是一种用于鉴定近交系动物组织相容性基因是否一致的简单可靠的方法。
1、 掌握近交系小鼠检测中常用的“尾→背”植皮的操作方法。
实验动物:近交系小鼠;6~8周龄,15~20g,2~5只。
1、器械:眼科剪、眼科镊、剪毛剪、手术刀、消毒手术巾一块,消毒包扎纱布若干,消毒棉球若干,0号缝线一卷,培养皿两个,胶布、蜡板两块。
2、试剂:戊巴比妥钠,75%酒精、生理盐水、碘酒、新洁尔灭消毒液。
“尾→背”植皮法是将小鼠尾部的皮肤移植到同品系的异体小鼠的背部。因为尾部的皮肤与背部的皮肤有明显的不同即尾部的皮肤毛少,有光泽,而背部的皮肤毛长、浓厚,所以将尾部的皮肤移植到背部后,若组织相容性基因结合,则尾皮可以很好的生长在背部;若组织相容性基因不合,则尾皮在手术后1-3周内被排斥掉,背部留下一块伤痕,结果极易判断。
1、 先将手术器械、手术巾、包扎纱布若干放入高压灭菌锅内消毒。手术前半小时,将眼
3、将供体小鼠固定在蜡板上,先用碘酒将小鼠的尾部消毒,再用75%酒精消毒,用二股0号缝线把小鼠尾根部扎紧。
4、 再分别用碘酒、75%酒精消毒拇指、食指和中指,然后左手拿住已消毒过的鼠尾,右
手持剪刀在鼠尾根扎线的下部剪下,用眼科剪刀,沿尾静脉剖开一条逢,用止血钳夹注尾骨,左手用力将尾皮剥下。
5、 把尾皮剪成0.5Î0.5cm大小的皮片放入盛有无菌生理盐水的培养皿中,用手术刀把皮
下结缔组织刮掉,最后把皮片平铺在已被生理盐水浸湿的无菌纱布上。
6、 分别用碘酒、75%酒精消毒受体小鼠已煎掉毛的部位,盖上手术巾。用眼科镊在此部
位剪开一个约0.3Î0.3cm的方形洞,再用眼科镊将纱布上已备好的供体皮片镶嵌在此方洞内铺平,用无菌棉球吸去多余的血液,使植皮紧贴受体的肌体,并与宿主的边缘密切吻合。
7、 在闯口处覆盖上3~4层2Î3cm的无菌纱布,分别在小鼠的胸部与腹部用胶布包扎两
道,胸部的包扎要略紧于腹部。最后将小鼠在蜡板上取下,放回到原来笼中,登记手术时间。
8、 结果观察:手术第二周方可拆包,若植皮不被排斥,则与宿主的背底部愈合,植皮色
泽与周围一致,不应有充血或炎症现象;若植皮受到排斥(或手术失败),则拆包时皮片可能已经脱落,即使没有脱落的皮片,其周围有炎症现象,再过几天皮片也会脱落下来。