动物实验

广东药科大学实验动物中心

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常用实验动物的给药途径和方法
发布时间:2010-07-14     来源:     作者:

在动物实验中,为了观察药物对机体功能、代谢及形态的变化,常需将药物注入动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。

一 经口给药法

(一)灌胃法

此法给药剂量准确,是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法。

1、白鼠灌胃法:抓起小鼠,以左手拇指、食指固定头部,小指、无名指和掌心夹注尾巴,使腹部朝上,颈部拉直,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的口角插入口腔,从舌背沿上腭插入食道。灌胃量0.2~0.5ml/10g。

胃管可用适宜口径的硬质塑料管或磨去针头的8号注射针头弯成适当的弧度制成。

注意,操作时不要用力猛插,以免插破食道或误插入器官造成动物死亡。

2、白鼠灌胃法:左手戴上棉手套,用左手拇指和食指将大鼠头部固定,将大鼠

灌胃器沿腭后壁慢慢插入食道。灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,重新再插。灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。灌胃量10~20ml/kg

3 兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之间,然后将灌胃管(常用导尿管代替)从开口器的小孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插入胃中,未误入气管。此时将注射器与灌胃管相连,注入药液。

4、猪的胃内灌注法:给猪下鼻饲管较困难,因猪的鼻翼与上唇联合形成吻突,鼻腔内上下鼻夹与鼻中隔通道极窄,只能通过F10-12号的导尿管,F14号以上的导尿管不能插入,故一般均给猪采用经口入胃的灌胃方法。具体方法是,预先做好一矩形小木块,中间有一洞,让小猪咬住,将其固定,然后再由此洞下胃管。此种操作较为简便。

5、鸟类:包括鸽、鸡等,经口灌胃给药,可由助手将其身体用毛巾裹住固定好。实验者用左手将动物向后拉,使其颈部倾斜,用左拇指和食指将动物嘴撬开,其他三只手指固定好动物头部,右手取带有灌胃针头的注射器,将灌胃针头由动物舌后插入食管。不要象其它动物灌胃时插的太深,如动物不挣扎,插针头又很顺利,即可将药液经口或食管上端罐入胃内。罐入速度要慢。

(二)口服法

口服给药是把药物混入饲料或溶于饮水中让动物自由摄取。此法优点是简单方便,缺点是剂量不能保证准确,且动物个体间服药量差异较大。大动物在给予片剂、丸剂、胶囊剂时,可将药物用镊子或手指送到舌根部,迅速关闭口腔,将头部稍稍抬高,便其自然吞咽。

二 注射给药法

注射给药剂量准确、作用快,是动物实验中常用的给药方法,给药时应注意针头的选择 (鼠类:4~5号 ,兔、猫、犬、猪、猴:6~8号)。

(一)皮下注射法

注射一般选取皮下组织疏松的部位,大鼠、小鼠和豚鼠可在颈后肩肿间、腹部两侧作皮下注射;家兔可在背部或耳根部作皮下注射;猫、犬则在大腿外侧作皮下注射。以小白鼠为例,将小白鼠放在笼盒盖上,用左手小指和无名指捏住鼠尾,轻轻向后拉,用拇指和食指捏起背部皮肤,再用右手持注射器,右手将注射器的针头水平刺入背部皮下。针头可用5号针头。推送药液使注射部位隆起。拔针时,以手指捏住针刺部位,可防止药液外漏。

注射量:大鼠为 1ml/100g、小鼠为 0.1~0.3ml/10g。

鸟类皮下注射通常选取翼下部位,可注射0.3ml~0.5ml药液。鸽类皮肤弹性差,注射液有时从针口流出。

(二)皮内注射法

固定动物的方法和注射部位与皮下相同。将注射部位脱毛、消毒,用左手拇指和食指压住皮肤并便之绷紧,在两指之间,用皮试针头紧贴皮肤表层刺入皮内,然后向上挑起并再稍刺入,当针头不能左右摆动时,即表明针头在皮内,回抽无回流后,即可缓慢注射,皮肤表面出现白色桔皮样隆起,若隆起可维持一定时间,则证明药液确实注射在皮内。注射量:小鼠为 0.1ml/次/穿刺部位。

(三)肌肉注射法

肌肉注射一般选肌肉发达,无大血管通过的部位。大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉;家兔可在腰椎旁的肌肉、臀部或股部肌肉注射;犬、猴等大型动物选臂部注射。注射时针头宜垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可注射。

小鼠:可二人合作,一人一手抓住小鼠头部皮肤,另一手抓住尾巴。另一人取连有4号针头的注射器,将针头刺入后腿外侧肌肉。注射量:不超过0.1ml。

也可一人操作,方法是左手单手控制小鼠,并见将小鼠右脚趾拉放于左侧面,用左手无名指压住。将针头刺入右腿外侧肌肉。

家兔:将家兔用小动物手术台固定,注射部位可选择大腿肌肉。例如家兔股四头肌注射法:在家兔腿部两侧四头肌部位皮肤,用2%碘酒消毒,再用75%酒精擦去碘质,分别在股四头肌部位注射药液1 ml和 2 ml,作药物局部刺激性实验。

鸟类:禽鸟类肌肉注射常选取胸肌或腓肠肌肌肉注射,方法同大、小鼠。

(四)腹腔注射法

给大鼠、小鼠进行腹腔注射时,以左手固定动物,便腹部向上,为避免伤及内脏,应尽量便动物头处于低位,便内脏移向上腹,右手持连有5号针头的注射器从下腹两侧向头部方向刺入,控制针头与腹部的角度不宜太小,否则易误入皮下。针头亦不宜刺入太深或太近上腹部,以避免损伤内脏。将注射器沿45°角斜向穿过腹肌进入腹腔,此时有落空感,回抽无回血或尿液,即可注入药液。

小鼠注射量为 0.2~0.4ml/10g

兔、犬等动物腹腔注射时,可由助手固定动物,便其腹部朝上,实验者即可进行操作。其位置:家兔下腹部近腹中线左右两侧 lcm处,犬脐后腹中线两侧边 1~2cm处进行腹腔注射。

(五)静脉注射法

1. 小鼠:常采用尾静脉注射。注射时,先将小鼠固定在暴露尾部的固定器内,尾

部用40℃的温水浸润几分钟或用 75% 酒精棉球反复擦拭使血管扩张充血。以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,用中指从下面托起鼠尾,右手持带有4号针头的注射器,使针头尽量采取与尾部平行的角度进针,从尾巴近末端处刺入,注入药液,如无阻力,表示针头己进入静脉。注射量为 0.05~0.2ml/10g

2. 大鼠: 将小鼠固定在暴露尾部的固定器内,露出尾巴,用10 ml试管盛45℃~50

℃的温水浸润1~2分钟或用 75% 酒精棉球反复擦拭使血管扩张,并使表皮角质软化,可明显见到三根暗红色的尾静脉。选择较明显的一条,在尾下1/4处,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,用中指从下面托起鼠尾,右手持注射器,使针头尽量采取与尾部平行的角度(小于30度)进针,刺入,针头在尾静脉内平行推进少许,左手的三指捏住尾巴,并连针头和鼠尾一起捏住,以防大鼠活动将针头脱出。注入药液,如无阻力,表示针头己进入静脉。注射后把尾部向注射侧弯曲,或拔针后随即以干棉球按住注射部位以止血。

注意:大小鼠尾静脉注射部位应尽量选在鼠尾下1/3处,此处皮薄,血管较易注入,常用鼠尾左右两侧两根尾静脉,因其位置较固定,容易注入。背侧尾静脉由于其位置容易动,固一般少用。腹侧面是动脉,不采用作静脉注射。

大鼠舌下静脉注射:

将大鼠用40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射法麻醉,用鼠板固定大鼠,当大鼠进入麻醉状态后,用止血钳将大鼠舌头稍微拉出,露出舌下正中小静脉,用左手持止血钳固定舌尖部,右手持连有4号针头的注射器,在舌下静脉近中部向舌头基底部方向进针,刺入舌下静脉血管,使针头与血管平行。慢慢向前推进,当进针顺利时,表示针头已进入舌下静脉,可以慢慢推注药液。注射完毕将针头抽出,用干棉球压迫注射部位止血。

3. 家兔:一般采用耳缘静脉注射。注射时先将家兔用固定盒固定,拔去注射部位的

毛,用酒精棉球涂擦耳缘静脉,并用手指弹动或轻轻揉擦兔耳,使静脉充血,再涂上一薄层凡士林,此时可清楚见到充血的耳缘静脉,然后用左手拇指和食指压住耳根端,待静脉显著充盈后,右手取连有4 1/2号针头的注射器,针头从靠近耳尖部刺入静脉,顺血管平行方向深入1cm,放松对耳根处血管的压迫,左手拇指和食指,移至针头刺入部位,将针头和兔耳固定,然后向外略抽一下注射器,如有血液回流,即可注入药液。或当针头插入血管后不必回抽,针头在血管推进顺利,捎推注射液,即能自然注入,皮下不起液泡,即证实药液注进血管。注射后,拔出针头,用纱布或脱脂棉压迫止血。

注意:(1)如注射处组织变白,变厚,或注射时推注阻力大,表示针头未插入血管,应

拔出针头重插。兔耳中间的是动脉,兔耳内缘的静脉因毛多皮厚,故不宜作静脉注射用。(2)注射针头的号码代表针头内径的粗细。注射部位的组织坚韧宜用粗针头,以免弯曲、折断;如组织柔嫩或血管细小,宜用细针头,以免损伤组织。

4. 犬:

后肢外侧小隐静脉注射法:

小隐静脉在后肢胫部下1/3的外侧面浅表皮下,由前侧向后走向。将狗固定侧卧,把注射部位毛剪去,先用碘酒,后用酒精擦抹消毒皮肤。助手用手紧握股部,压迫血管,使静脉不回流,此时可见到充血的小隐静脉,右手持连有5 1/2号或5号的注射器,将针头向血管旁皮下先刺入,而后与血管平行刺入静脉。如进针顺利,回抽针栓有回血,放松对静脉近端的压迫,将针头顺血管再刺进稍许。然后一手固定针头,一手将药液缓缓注入静脉。注意要很好固定静脉,因为静脉只隔一层皮肤,浅而易滑动,注射时针头不可刺入过深,方向一定要与血管平行。

前肢内侧头静脉注射法:

前肢内侧头静脉在前肢内侧面皮下,靠前肢内侧外缘走向,比后肢外侧小隐静脉还粗一些,而血管比较容易固定。因此常用作静脉注射及取血用。注射方法与前述后肢外侧小隐静脉注射法相同。

舌下小静脉注射法:

此法较方便有效,用于补注麻醉药或紧急注射药物等用。注射前将麻醉的狗嘴打开,用舌钳 包着纱布把舌头拉出,并翻向背侧,即可见到清楚的舌下小静脉,可找一根较粗的作静脉注射用。将舌头尽量拉出,左手拇指压迫舌下静脉根部,见到充血舌下静脉,用连4号针头的注射器与血管平行插进静脉、回血,推进药液。注射完毕将针头抽出,立即用干棉球压迫止血,或用止血粉止血。因舌下小静脉周围都是软组织,且血管分布很丰富,故应选择4 1/2号以下的细号针头,注射完毕要及时有效止血。

5.豚鼠:可采用前肢皮下头静脉、后肢小隐静脉注射或耳缘静脉注射。

6. 猴:猴常在后肢小隐静脉、皮下静脉或股静脉注射,注射方法与犬静脉注射法基本相

同。

7.猪:可在耳静脉 、颈静脉注射。

8.蟾蜍胸淋巴囊注射法

取蟾蜍一只,一手抓住蟾蜍身体,固定四肢,使腹部朝上;另一手持(4~7号针头)将针头插入口腔,通过下颌肌肉而刺入,注射药液后拨出针头,由于下颌肌内收缩使针孔闭合,可避免药液漏出。注射量每只0.25~1.Oml。

三 其它途径给药法

除上述较常用的给药途径外,还有其他一些给药方法,如呼吸道给药、皮肤给药、脑内给药、直肠内给药、关节腔内给药等等。

1. 呼吸道给药:呈粉尘、气体及蒸气或雾等状态的药物或毒气,均需要通过动物呼吸道给药。如实验时给动物乙醚作吸入麻醉,给动物吸入一定量的氨气,二氧化碳等观察呼吸,循环等的变化;给动物定期吸入一定量的SO2。用锯末烟雾制作慢性气管炎动物模型等,特别在毒理学实验中应用更为广泛。

2. 皮肤给药:为了鉴定药物或毒物经皮肤的吸收作用、局部作用、 致敏作用和光感作用等,均需采用经皮肤给药方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面积的皮肤脱毛后,将一定的药液涂在皮肤上,药液经皮肤吸收。

3. 脊髓腔内给药:此法主要用于锥管麻醉或抽取脑脊液。

家兔椎管内注射方法:将家兔作自然俯卧式,尽量使其尾向腹侧屈曲,用剪毛剪将第七腰椎周围被毛剪去,用3%碘酊消毒,而后用75%酒精将碘酊擦去。在兔背部髌骨脊连线之中点稍下方摸到第七腰椎间隙(第七腰椎与第一骶骨之间),插入腰椎穿刺针头。当针到达椎管内时(蛛网膜下腔),可见到兔的后肢跳动,即证明穿刺针头已进入椎管。这是不要再向下刺,以免损伤脊髓。固定好针头,即可将药物注入。

4. 脑内给药:此法常用于微生物学动物实验,将病原体等接种于被检动物脑内,然后观察接种后的各种变化。

5. 直肠内给药:此种方法常用于动物麻醉。兔直肠内给药时,常采用灌肠的胶皮管或用14号导尿管代替。

6. 关节腔内给药:此法常用于关节炎的动物模型复制。

7.脚掌注射法:

(1)小鼠:注射前小鼠应先麻醉。因前脚需用以取食,故仅能用后脚掌。针头刺入约5mm,即可推液,最大量为0.25ml。如果使用福氏完全佐剂,注入脚掌后,可使足掌部形成严重肿胀、溃疡及坏死,动物行动困难,因此,若非实验必须,最好不要使用。其它试剂虽然不致引起如此强烈的反应,最好仅用一只后脚掌。

(2)豚鼠:由助手固定好动物,使后脚掌面向操作者。用棉签沾水将脚掌洗净,特别是脚趾之间,再用酒精棉消毒。其它同小鼠。针头刺入约5mm即可推液。最大量为0.25ml。


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