当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。
常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住，露出头部,左手执蛙，并用食指按压其头部前端，拇指按压背部，使头前俯；右手持探针由凹陷处垂直刺入，刺破皮肤即入枕骨大孔。这时将探针尖端转向头方，向前深入颅腔，然后向各方搅动，以捣毁脑组织。再把探针由枕骨大孔刺入并转向尾方，刺入椎管，以破坏脊髓。脑和脊髓是否完全破坏,可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。拔出探针后,用一小干棉球将针孔堵住,以防止出血。操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内。如被射入时，则需立即用生理盐水冲洗眼睛。
1. 颈椎脱臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头。将脊髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡。
2. 急性大出血法：可采用鼠眼眶动脉和静脉急性大量失血方法使鼠立即死亡。
3. 化学药物致死法：在一密闭容器内，预先放入浸有全身麻醉作用的乙醚或氯仿的棉花，将动物投入容器内，使动物吸入麻醉药而致死。或者腹腔注射戊巴比妥钠，注射量为100~150mg/kg。大鼠也可静脉注射25%氯化钾溶液0.6ml/只。吸入一定量的一氧化碳、二氧化碳等均可使动物致死。
1. 空气栓塞法：向动物静脉内注入一定量的空气,使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液成泡沫状，随血液循环到全身。如进到肺动脉，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入20～40ml空气即可致死。每条狗由前肢或后肢皮下静脉注入80～150ml空气，可很快致死。
2. 急性失血法：先使动物轻度麻醉，如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥钠20～30mg，动物即很快入睡。暴露股三角区，用锋利的杀狗刀在股三角区作一个约10厘米的横切口，把股动、静脉全切断，立即喷出血液。用一块湿纱布不断擦去股动脉切口周围处的血液和血凝块,同时不断的用自来水冲洗流血,使股动脉切口保持畅通，动物在3～5分钟内即可致死。采用此种方法，动物十分安静，对脏器无损伤，对活杀采集病理切片标本是一种较好的方法。
如果处死狗的同时要采集其血液时，则在用硫喷妥钠轻度麻醉后，将狗固定在狗手术台上。分离颈动脉，插一根较粗的塑料管，放低狗头，打开动脉夹，使动脉血流入装有抗凝血的容器内，并不断摇晃，以防血液凝固。
（1）静脉注射10%氯化钾（KCL）溶液，使动物心肌松弛，失去收缩能力，心脏发生急性扩大致心跳停止死亡。成年兔耳缘静脉注入10%氯化钾（KCL）溶液5~10ml/只，狗由狗前肢或后肢皮下静脉注入20~30ml/只，即可致死。
（2）静脉注射10%福尔马林溶液，使血液内蛋白凝固，动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死。狗用20ml/只，即可致死。
（3）皮下注射士的宁致死：用量为：豚鼠为3.0~4.4mg/kg，家兔为0.3~0.5mg/kg，犬为0.3~0.42mg/kg。猫1.0~2.0mg/kg。
